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品牌 | 康為世紀 |
貨號 | CW2107M |
包裝規格 | 1kit |
純度 | % |
是否進口 | 否 |
產品名稱:康為世紀 無內毒素質粒大提試劑 負壓法
產品貨號:CW2107M
英文名稱:GoldVac EndoFree Plasmid Maxi Kit
產品規格:10 preps
產品介紹:
內毒素是質粒提取中常見的污染物,由于真核細胞對內毒素非常敏感,因此,如果質粒中含有內毒素會大大降低真核細胞轉染效率。本試劑盒提供一種快速、易大規模質粒制備的新方法。每次可處理100-300 ml菌液,獲得多至2 mg轉染級質粒DNA。使用真空裝置可同時純化多個樣本,45分鐘即可完成質粒提取,有效減少手動操作時間。特殊的緩沖液系統和除內毒素過濾器,有效去除內毒素、基因組DNA、RNA、蛋白等雜質。本試劑盒所得質粒純度高、提取量大,特別適用于細胞轉染,同時也可用于DNA測序,PCR,體外轉錄,內切酶消化等實驗。
產品組份:
產品特點:
1.提取速度快:利用真空裝置,40分鐘內快速純化多個樣本,有效減少手動操作時間
2.提取得率高:可從100-300 ml菌液,獲得多至2 mg轉染級質粒DNA。
3.產品品質高:提取的質粒DNA適用于大多數細胞株的高級轉染實驗。
配套試劑:
無水乙醇、異丙醇、真空泵、廢液收集裝置、真空純化裝置。
產品使用說明:
1.取100-300 ml過夜培養的菌液,加入離心管(自備)中,12,000×g離心2-3分鐘收集細菌,盡量吸棄全部上清。
2.向留有菌體沉淀的離心管中加入12 ml Buffer P1(請先檢查是否已加入RNase A),使用移液器或渦旋振蕩器充分混勻,懸浮細菌沉淀
3.向離心管中加入12 ml Buffer P2,溫和地上下顛倒混勻8-10次,使菌體充分裂解,室溫放置3-5分鐘。此時溶液應變得清亮粘稠。
4.向離心管中加入12 ml Buffer E3,立即上下顛倒混勻8-10次,此時出現白色絮狀沉淀,室溫放置5分鐘。將溶液全部倒入除內毒素過濾器中,慢慢推動推柄過濾,濾液收集在干凈的50 ml離心管中。
5.向濾液中加入0.3倍濾液體積的異丙醇,上下顛倒混勻
6.正確連接負壓裝置,將連接管與DNA吸附柱連接好后插到負壓裝置的插口上
7.柱平衡:向DNA吸附柱中加入2 ml Buffer PS,開啟并調節負壓至-300~-700 mbar,吸去柱上溶液。
8.將步驟5中濾液與異丙醇的混合溶液轉移到平衡好的吸附柱中,吸去柱上溶液。
9.向DNA吸附柱中加入10 ml Buffer PW吸去柱上溶液。
10.保持負壓抽吸10分鐘,除去吸附膜內殘留漂洗液,干燥吸附膜。若一次抽吸6個樣品以上,可將負壓抽吸時間適當延長。待吸附膜 干燥后,關閉負壓開關。
11.將壓力恢復至0 mbar時,取下吸附柱,將DNA吸附柱置于一個新的50 ml離心管中,向吸附膜的中間部位加入1-3 ml Endo-Free Buffer EB,室溫放置2-5分鐘,12,000×離心5分鐘,將質粒溶液收集到離心管中。-20℃保存質粒。
保存條件:
室溫 (15-30℃)
產品訂購信息:
品牌 貨號 名稱 規格
康為世紀 CW2107S 超量無內毒素質粒大提試劑盒 2 preps
關于公司:
康為世紀生物科技股份有限公司是一家立足于生命科學領域,有自主知識產權的國家高新技術企業,主要從事高附加值、高技術含量的生物試劑的研發與生產,為生命科學研究、基因檢測和體外診斷用戶提供創新型生物產品和服務。公司曾先后被評為國家高新技術企業、江蘇省科技型中小企業、江蘇省瞪羚企業、江蘇省民營科技企業。公司建立了專業化、集約化、能夠形成自主知識產權的技術創新體系和開放式的合作創新平臺,構建成了公司完整的研發創新體系。
產品線主要包括分子診斷原料酶、核酸采集與保護劑、核酸提取試劑盒、分子診斷檢測試劑等,打破了中國生物研究與產業對進口試劑的依賴。
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