內毒素,又名脂多糖。顧名思義,就是多糖鏈上帶了幾個酯鏈。內毒素存在于革蘭氏陰性菌,由于細菌的廣泛分布,受到內毒素污染的物品比比皆是。但是,內毒素一般只有在進入體液(包括血液)中時才會誘發免疫反應甚至發燒。所以,日用品中的內毒素可以說是對人體毫無影響,但醫療用品中的內毒素就十分危險了。因此,醫療用品的生產環節中都會盡量避免內毒素的引入,對于無法避免的,也會采用多種方法去除。在質控環節,仍然需要對產品進行抽樣檢測,但是內毒素的含量極小,每毫升多則幾納克級別,少則幾皮克,所以檢驗的精度就至關重要。今天小編就來帶大家了解一下內毒素檢測的實驗原理:
內毒素檢測的方法分類:
1.凝膠法
凝膠法系通過鱟試劑與內毒素產生凝集反應的原理來檢測或半定量內毒素的方法。在本檢查法規定的條件下,使鱟試劑產生凝集的內毒素濃度即為鱟試劑的標示靈敏度,用EU/ml表示。
2.光度測定法
光度測定法分為濁度法和顯色基質法。
濁度法系利用檢測鱟試劑與內毒素反應過程過程中的濁度變化而測定內毒素含量的方法。根據檢測原理,可分為終點濁度法和動態濁度法。終點濁度法是依據反映混合物中的內毒素濃度和其在孵育終止時的濁度(吸光度和透光率)之間存在著量化關系來測定內毒素含量的方法。動態濁度法是檢測反應混合物的濁度到達某一預先設定的吸光度所需要的反應時間,或是檢測濁度增加速度的方法。
顯色基質法系利用鱟試劑與內毒素反應過程中產生的凝固酶使特定底物顯色釋放出的呈色團的多少而測定內毒素含量的方法。根據檢測原理,分為終點顯色法和動態顯色法。終點顯色法是依據反應混合物中內毒素濃度和其在孵育終止時釋放出的有色團的量之間存在著量化關系來測定內毒素含量的方法。動態顯色法是檢測反應混合物的色度到達某一預先設定的吸光度所需要的反應時間,或是檢測色度增長速度的方法。
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